Production of calves following nonsurgical transfer of fresh and refrigerated bovine demi-embryos

Abstract

Alkionhalkaisun ja -siirron tehokkuutta selvitettiin kahdessa kokeessa siirtämällä halkaistuja alkioita tuoreina tai yön yli säilytyksen (4°C) jälkeen. Alkionhalkaisut suoritettiin yksinkertaisella mikroveitsitekniikalla maatilalla. Kokeessa 1 siirrettiin 28 alkion puolikasta tuoreena vastaanottajahiehoihin, joista 20 tiinehtyi (71,4 %) tuottaen 19 vasikkaa. Kylmäsäilytyksen jälkeen (kokonaissäilytysaika 17-18 tuntia) 14 alkion puolikkaasta 12 arvioitiin siirtokelpoisiksi. Näistä yhdeksän siirrettiin vastaanottajahiehoihin, joista viisi tiinehtyi tuottaen neljä vasikkaa. Kokeessa 2 siirrettiin 21 alkion puolikasta vastaanottajahiehoihin. Näistä 12 tiinehtyi (57,1 %) poikien 10 vasikkaa. Kylmäsäilytyksen (kokonaissäilytysaika 22-24 tuntia) jälkeen siirrettiin 19 alkion puolikasta hiehoihin, joista viisi tiinehtyi. Näistä neljä poiki vasikan. Tulosten perusteella voidaan todeta, että yksinkertaisella tekniikalla on mahdollista tuottaa halkaistuja alkioita, joiden elinkyky alkionsiirron jälkeen on samaa luokkaa kuin mitä yleensä saadaan käsittelemättömillä alkioilla. Kylmäsäilytyksen jälkeen halkaistujen alkioiden elinkyky heikkenee selvästi, mutta halkaistujen alkioiden kylmäsäilytys voi joissakin tilanteissa olla käytännöllistä. Toisen puolikkaan voi siirtää vastaanottajalle heti halkaisun jälkeen ja toisen seuraavana päivänä kylmäkuljetuksen jälkeen esimerkiksi toisella paikkakunnalla. Toinen menetelmän sovellutus on ottaa alkioista koepaloja, lähettää ne laboratorioon analysoitavaksi, ja valita diagnoosituloksen perusteella, mitkä kylmäsäilytetyistä alkioista siirretään seuraavana päivänä.

The viability of microblade-bisected Day-7 embryos transferred to recipients without zona pellucidae directly after splitting or after overnight storage at 4°C was investigated in two experiments. In Experiment 1, 26 demi-embryos of excellent or good quality and two of fair quality were transferred to 28 heifer recipients 1-3 h after splitting. The transfers resulted in 20 pregnancies (71.4% pregnancy rate), and 19 calves were born (one pregnant heifer was slaughtered). Another 14 demi-embryos were cultured 1 to 3 h at room temperature, transported for 3 h at 8-10°C and stored for 12 h in a refigerator at 4°C. Twelve of the 14 demi-embryos were considered transferable after storage and nine of these were transferred to nine recipients, of which five became pregnant. Four live calves were born. In Experiment 2, 21 excellent or good quality demi-embryos were transferred into 21 heifer recipients to produce 12 pregnancies (57.1%) and 10 live calves. Another 19 demi-embryos (17 excellent to good quality and two fair quality) were transferred after storage for 1-2 h at 8°C and 18 h at 4°C. Five recipients became pregnant, of which four delivered live calves. It is concluded that a high pregnancy rate can be achieved after the transfer of fresh demi-embryos produced by a simple method of embryo bisection under farm conditions. Although the transfer of demi-embryos stored overnight at 4°C results in decreased pregnancy rates, refrigeration of demi-embryos may be useful in certain practical situations. However, further experiments are needed to determine the optimal conditions for overnight storage of demi-embryos.